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                    當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  支原體核酸法的特異性驗(yàn)證

                    支原體核酸法的特異性驗(yàn)證

                    更新時(shí)間:2020-07-07  |  點(diǎn)擊率:876

                    支原體核酸檢測(cè)法包括常規(guī)PCR法和qPCR法。和傳統(tǒng)方法比較,它具有:

                    ①靈敏度高,特異性好。

                    ②時(shí)間短,2-3小時(shí)出結(jié)果。

                    ③操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。

                    因而在科研和生物制藥工業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。

                    歐洲藥典也指出,核酸法可替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和DNA染色法,但需要對(duì)檢測(cè)限、特異性和耐用性進(jìn)行方法學(xué)的評(píng)估。

                     

                    歐洲藥典根據(jù)支原體在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)生的頻率,提出: 核酸法應(yīng)能至少檢測(cè)如下9種支原體,即精氨酸支原體、口腔支原體、雞敗血支原體、肺炎支原體、關(guān)節(jié)液支原體、發(fā)酵支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾原體和檸檬螺原體。

                     

                    對(duì)于特異性的驗(yàn)證方面,歐洲藥典指出,應(yīng)選用不同于支原體的合適的細(xì)菌物種,其中合適的是與支原體有密切親緣關(guān)系的細(xì)菌屬,它們包括梭菌、乳酸桿菌和鏈球菌。

                     

                    由于核酸法的特異性主要受到引物設(shè)計(jì)、探針和PCR擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)的反應(yīng)條件影響,不同檢測(cè)試劑盒的性能也會(huì)有一些不同,因此特異性的驗(yàn)證是非常必要的。如果發(fā)現(xiàn)某細(xì)菌菌株與支原體有交叉反應(yīng),那么對(duì)于核酸法的陽性結(jié)果,還需要采用第二種方法進(jìn)行證實(shí)。

                    之前小編向您介紹過德國MB公司(Minerva Biolabs)的靈敏度驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)品,這次向您介紹的是德國MB公司提供的特異性驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)品。

                    產(chǎn)品介紹

                    核酸法特異性驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)品

                     

                    1. 支原體基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)品

                    用途:用于PCR和qPCR方法對(duì)支原體物種的特異性檢查。

                     

                    貨號(hào)

                    基因組DNA產(chǎn)品

                    51-0116

                    萊氏無膽甾原體基因組DNA

                    Acholeplasma laidlawii

                    51-0129

                    精氨酸支原體基因組DNA

                    Mycoplasma arginini

                    51-0117

                    發(fā)酵支原體基因組DNA

                    Mycoplasma fermentans

                    51-0195

                    生殖支原體基因組DNA

                    Mycoplasma genitalium

                    51-0130

                    豬鼻支原體基因組DNA

                    Mycoplasma hyorhinis

                    51-1746

                    滲透支原體基因組DNA

                    Mycoplasma penetrans

                    51-0124

                    關(guān)節(jié)液支原體基因組DNA

                    Mycoplasma synoviae

                    51-0162

                    關(guān)節(jié)炎支原體基因組DNA

                    Mycoplasma arthritidis

                    51-0115

                    雞毒支原體基因組DNA

                    Mycoplasma gallisepticum

                    51-0111

                    人型支原體基因組DNA

                    Mycoplasma hominis

                    51-0112

                    口腔支原體基因組DNA

                    Mycoplasma orale

                    51-0119

                    肺炎支原體基因組DNA

                    Mycoplasma pneumoniae

                    51-0164

                    檸檬螺旋原體基因組DNA

                    Spiroplasma citri

                    51-0177

                    解脲支原體基因組DNA

                    Ureaplasma urealyticum

                     

                     

                    每盒含1管支原體基因組DNA(10ng ±2ng)+

                    1管200μl 10mM Tris緩沖液(pH8.5)

                     

                    2. 細(xì)菌基因組DNA 標(biāo)準(zhǔn)品

                    用途:用于PCR和qPCR方法的特異性驗(yàn)證。

                     

                    貨號(hào)

                    基因組DNA產(chǎn)品(共64種)

                    2130-07288

                    洋蔥伯克霍爾德菌基因組DNA

                    Burkholderia cepacia

                    51-0101

                    嗜肺軍團(tuán)菌基因組DNA

                    Legionella pneumophila

                    51-1514

                    嗜肺軍團(tuán)菌弗雷澤亞種基因組DNA

                    Legionella pneumophila subsp. fraseri

                    51-1515

                    嗜肺軍團(tuán)菌牧場(chǎng)亞種基因組DNA

                    Legionella pneumophila subsp. pascullei

                    51-1368

                    博茲曼氏軍團(tuán)菌基因組DNA

                    Legionella bozemanii

                    51-1370

                    杜莫夫氏軍團(tuán)菌基因組DNA

                    Legionella dumoffii

                    51-1533

                    約旦軍團(tuán)菌基因組DNA

                    Legionella jordanis

                    51-1723

                    嗜酸乳桿菌基因組DNA

                    lactobacillus acidophilus

                    51-0566

                    肺炎鏈球菌基因組DNA

                    Streptococcus pneumoniae

                    51-0792

                    丙酮丁醇梭菌基因組DNA

                    Clostridium acetobutylicum

                    51-5571

                    百日咳桿菌基因組DNA

                    Bordetella pertussis

                    51-3415

                    副百日咳桿菌基因組DNA

                    Bordetella parapertussis

                    2102-04688

                    空腸彎曲菌基因組DNA

                    Campylobacter jejuni

                    51-1386

                    白色念珠菌基因組DNA

                    Candida albicans

                    2103-11226

                    光滑念珠菌基因組DNA

                    Candida glabrata

                    2104-11947

                    吉利蒙假絲酵母基因組DNA

                    Candida guilliermondii

                    2127-30007

                    鮑曼不動(dòng)桿菌基因組DNA

                    Acinetobacter baumannii

                    2128-30187

                    嗜水氣單胞菌基因組DNA

                    Aeromonas hydrophila

                    2101-00819

                    煙曲霉基因組DNA

                    Aspergillus fumigatus

                    51-0031

                    蠟樣芽孢桿菌基因組DNA

                    Bacillus cereus

                    51-0010

                    枯草芽孢桿菌基因組DNA

                    Bacillus subtilis

                    2129-02046

                    蘇云金桿菌基因組DNA

                    Bacillus thuringiensis

                    2105-70624

                    希木龍念珠菌基因組DNA

                    Candida haemulonii

                    2125-90874

                    熱帶念珠菌基因組DNA

                    Candida tropicalis

                    2106-30039

                    弗氏檸檬酸桿菌基因組DNA

                    Citrobacter freundii

                    2107-04595

                    克氏檸檬酸桿菌基因組DNA

                    Citrobacter koseri

                    2108-00756

                    產(chǎn)氣莢膜梭菌基因組DNA

                    Clostridium perfringens

                    51-0053

                    產(chǎn)氣腸桿菌基因組DNA

                    Enterobacter aerogenes

                    2111-20680

                    鉛黃腸球菌基因組DNA

                    Enterococcus casseliflavus

                    51-0478

                    糞腸球菌基因組DNA

                    Enterococcus faecalis

                    2114-20160

                    希氏腸球菌基因組DNA

                    Enterococcus hirae

                    2115-08579

                    大腸桿菌0157:H7
                    基因組DNA

                    Escherichia coli 0157:H7

                    2131-05934

                    嗜熱脂肪土芽孢桿菌基因組DNA

                    Geobacillus stearothermophilus

                    2133-70603

                    耐藥型肺炎克雷伯菌基因組DNA

                    Klebsiella pneumoniae, ESBL+

                    51-1370

                    杜氏熒光桿菌基因組DNA

                    Fluoribacter dumoffii

                    2110-30054

                    陰溝腸桿菌陰溝亞種基因組DNA

                    Enterobacter cloacae subsp. cloacae

                    2112-30633

                    耐久腸球菌基因組DNA

                    Enterococcus durans

                    2113-20477

                    屎腸球菌基因組DNA

                    Enterococcus faecium

                    51-0083

                    大腸桿菌基因組DNA

                    Escherichia coli

                    2132-30104

                    肺炎克雷伯菌基因組DNA

                    Klebsiella pneumoniae

                    2134-30164

                    摩氏摩根菌基因組DNA

                    Morganella morganii

                    51-4479

                    奇異變形桿菌基因組DNA

                    Proteus mirabilis

                    51-0071

                    銅綠假單胞菌基因組DNA

                    Pseudomonas aeruginosa

                    2117-30121

                    粘質(zhì)沙雷氏菌基因組DNA

                    Serratia marcescens

                    2138-05570

                    宋內(nèi)志賀氏菌基因組DNA

                    Shigella sonnei

                    51-0231

                    金黃色葡萄球菌基因組DNA

                    Staphylococcus aureus

                    2118-20328

                    人葡萄球菌基因組DNA

                    Staphylococcus hominis

                    2120-20229

                    腐生性葡萄球菌基因組DNA

                    Staphylococcus saprophyticus

                    2122-20480

                    牛鏈球菌基因組DNA

                    Streptococcus bovis

                    2126-20523

                    變形鏈球菌基因組DNA

                    Streptococcus mutans

                    2139-20068

                    血鏈球菌基因組DNA

                    Streptococcus sanguinis

                    2140-04780

                    結(jié)腸炎耶爾森菌

                    Yersinia enterocolitica

                    51-3361

                    耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌

                    Methicilin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)

                    51-0030

                    藤黃微球菌基因組DNA

                    Micrococcus luteus

                    2135-10036

                    腦膜炎奈瑟氏菌基因組DNA

                    Neisseria meningitidis

                    2136-13387

                    普通變形桿菌基因組DNA

                    Proteus vulgaris

                    51-7058

                    腸道沙門氏菌基因組DNA

                    Salmonella enterica

                    2137-04782

                    福氏志賀氏菌基因組DNA

                    Shigella flexneri

                    51-0164

                    檸檬螺旋原體基因組DNA

                    Spiroplasma citri

                    51-0044

                    表皮葡萄球菌基因組DNA

                    Staphylococcus epidermidis

                    2119-20263

                    溶血性葡萄球菌基因組DNA

                    Staphylococcus haemolyticus

                    2121-50170

                    嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌基因組DNA

                    Stenotrophomonas maltophilia

                    2123-06176

                    無乳鏈球菌基因組DNA

                    Streptococcus dysgalactiae

                    2141-08992

                    假結(jié)核耶爾森菌基因組DNA

                    Yersinia pseudotuberculosis

                     

                     

                    以上每盒細(xì)菌基因組DNA 標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格為≈10 ng。

                     

                    說明:

                    1. 基因組DNA來自確定的微生物物種(有NCTC編號(hào)),且傳代次數(shù)較少。

                    2. 基因組DNA經(jīng)吸附柱的方法抽提,并經(jīng)部分測(cè)序以驗(yàn)證其物種。

                    3. DNA的量和質(zhì)量均采用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行評(píng)估。

                    4. 每個(gè)批次標(biāo)準(zhǔn)品廠家均提供質(zhì)控證書(COA)。

                    5. 基因組DNA為凍干粉,附帶的Tris緩沖液用于溶解DNA凍干粉,具體操作見質(zhì)控證書。

                    6. 基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)品均為室溫運(yùn)輸,2-8℃保存。

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