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                    發(fā)現(xiàn)治療流感和寨卡病毒的新型抗病毒的藥物

                    更新時間:2021-01-25  |  點(diǎn)擊率:805

                    淀粉樣蛋白是一種特殊的蛋白質(zhì)組合物,其性質(zhì)與蠶絲相似,具有多種功能。蛋白質(zhì)錯誤折疊導(dǎo)致蛋白質(zhì)失活時也會形成這類蛋白質(zhì)。

                    Frederic Rousseau和Joost Schymkowitz (VIB-KU Leuven)利用這些特性發(fā)明了合成的淀粉樣蛋白肽,這種肽可以被定制來關(guān)閉所需的靶蛋白的功能。這些肽被稱為Pept-ins,已經(jīng)被證明是一種對付細(xì)菌病原體或減緩腫瘤生長的有效方法。現(xiàn)在,Schymkowitz和Rousseau的團(tuán)隊想要探索是否可以用Pept-ins來滅活病毒蛋白質(zhì),從而干擾病毒復(fù)制。

                     

                    研究人員設(shè)計了兩種分別在甲型流感病毒和寨卡病毒蛋白中發(fā)現(xiàn)的編碼病毒特異性淀粉樣蛋白序列的Pept-ins。在與Xavier Saelens (VIB-UGent)和Johan Neyts (KU Leuven)的合作中,他們測試了這些分子的抗病毒特性。

                    "我們發(fā)現(xiàn),每一種淀粉樣蛋白都會干擾相應(yīng)病毒的復(fù)制,"Schymkowitz和Rousseau實(shí)驗(yàn)室的博士生EmielMichiels解釋說。結(jié)果證明,效果是有特異性的。Michiels補(bǔ)充道:"對于甲型流感,我們證明我們的合成淀粉樣蛋白在感染部位聚集,并干擾了老鼠體內(nèi)的病毒復(fù)制。淀粉樣蛋白與病毒的靶蛋白結(jié)合,迫使該蛋白形成非功能性構(gòu)象。B型流感病毒不受這種蛋白的影響,這突出了這種相互作用的序列特異性。"

                    實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)細(xì)胞有時候很小心但也會有細(xì)胞死亡的情況,造成這種情況可能有很多因素其中使用不達(dá)標(biāo)的血清的事故不在少數(shù)。何為不達(dá)標(biāo)血清中的內(nèi)毒素這一項指標(biāo)是衡量的標(biāo)準(zhǔn)之一。

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                    例如:干細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),由于干細(xì)胞的原始性,它們對內(nèi)毒素非常敏感,所以,當(dāng)血清內(nèi)毒素偏高時,細(xì)胞很容易死亡,需要在試用前提早參看該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。

                    又例如:基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。所以,選擇極低內(nèi)毒素的血清,至關(guān)重要。

                    同樣,例如:原代培養(yǎng),雜交瘤融合,細(xì)胞轉(zhuǎn)染,難養(yǎng)細(xì)胞在體外的增殖(肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞等)....這些細(xì)胞的培養(yǎng)都需要內(nèi)毒素更低的血清,如果內(nèi)毒素過高,對細(xì)胞造成的損害,會大大影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

                    還有一些細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)室比較常用,經(jīng)常復(fù)蘇,培養(yǎng),凍存,如此,血清會經(jīng)常作用于細(xì)胞;還有的細(xì)胞需要培養(yǎng)的時間較長,血清會長時間作用于細(xì)胞;還有細(xì)胞典藏等項目,都需要使用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細(xì)胞的毒性影響。

                    另外,在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,如果出現(xiàn)使用同批次試劑培養(yǎng)的細(xì)胞大部分都出現(xiàn)問題情況,就需要鎖定是否是試劑的問題導(dǎo)致的。首先我們應(yīng)該先要檢查試劑的規(guī)格、效價是否與之前一致,如果有改變則需根據(jù)情況修改加入的量;然后我們要檢查試劑的品牌是否與之前一致,如果有更換應(yīng)驗(yàn)證該品牌是否能適用于這類細(xì)胞。Z后我們要檢查試劑的有效期是否過期、存放位置是否有問題、是否反復(fù)凍融等,以免試劑已因此而失效。總的來說,就是要選對試劑、買真試劑、驗(yàn)證好試劑、保存好試劑、正確使用試劑。

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